杂交瘤细胞融合后集落少？杂交瘤细胞培养基与集落形成率的关系

摘要：融合后第14天计数96孔板集落数，是判断杂交瘤细胞培养基是否合适的直接指标。本文对比三种培养条件的集落形成率数据。

关键词：杂交瘤细胞融合、集落形成率、杂交瘤细胞培养基、杂交瘤细胞、饲养层培养基、细胞生长补剂、HAT筛选、Hybriboost

细胞融合只是起点。真正决定后续能否筛到阳性克隆的，是融合细胞在96孔板里长出多少个集落。

一项对比实验把新融合的PEG杂交瘤细胞接种到96孔板，分三组培养：常规FCS培养基、含饲养层的FCS培养基、添加Hybriboost促杂交瘤细胞生长剂的FCS培养基。融合后第14天计数每板集落数，NS-1与SP2/0两种融合伴侣各做4次独立融合。

以NS-1为例，Hybriboost组每板约900–1500个集落，饲养层组约130–250个，常规FCS组约70–120个。SP2/0体系的趋势一致。

集落形成率的差距，来自细胞在筛选压力下的存活能力。基础培养基提供营养，但很难补上这一段生长支持。这也是不少实验室在融合后调整培养基配方的原因。

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图1 三种培养基中杂交瘤融合后的集落数（NS-1、SP2/0，4次独立实验；数据来自研发方验证实验）