Rooster化学成分限定无蛋白EV收集培养基｜MSC-EV生产方案

摘要：本文详解RoosterBio RoosterCollect-EV化学成分限定外泌体收集培养基的产品特性与技术参数，为MSC来源外泌体的标准化、可追溯生产提供解决方案。

关键词：外泌体、外泌体收集、外泌体富集、EV收集、化学成分限定培养基、外泌体收集培养基、MSC外泌体、cGMP级培养基、CD培养基、RoosterBio

RoosterCollect-EV（货号M2001）是RoosterBio公司推出的一款化学成分限定（Chemically Defined）外泌体/细胞外囊泡（EV）收集培养基，专为MSC来源外泌体的生产与"清洁收集"而设计。该培养基采用无异源（Xeno-free）、无蛋白（Protein-free）配方，经认证为低颗粒物水平，可降低外泌体收集过程中的背景干扰，提高产量并简化下游纯化流程。

在818号令的合规框架下，使用化学成分限定培养基的意义不仅在于技术性能的提升，更在于其为生产工艺提供了可追溯的成分来源和固定的配方体系——这正是监管部门对临床级生物制品原料的核心要求。RoosterCollect-EV的cGMP 级版本（RoosterCollect-EV-CC）更有 FDA II 型药物主文件（Master File）支持，为国内研究者衔接 NMPA 申报提供了国际合规基础。

RoosterCollect-EV 可无缝整合至EV、外泌体或细胞分泌组生产系统中，支持2D批次培养与3D生物反应器培养，收集时间窗口覆盖6至72小时。配合RoosterBio的hMSC细胞库与 RoosterNourish 扩增培养基，可构成一套从细胞扩增到外泌体收集的完整生产方案。

目前 RoosterBio 外泌体培养基覆盖从小试到规模化生产，包括RoosterCollect-EV（研究级）和RoosterCollect-EV-CC（cGMP 级），覆盖从实验室研发到临床生产的全阶段需求。

一、Rooster Collect-EV产品简介

1. 产品名称：RoosterCollect-EV（外泌体收集培养基）

2. 规格：500 mL（GMP级含有1L、10L规格，并支持定制化）

3. 配方类型：化学成分限定（Chemically Defined）

4. 动物源性：无异源（Xeno-free）

5. 蛋白含量：无蛋白（Protein-free）

6. 颗粒水平：低颗粒物（Low-particulate）

7. 设计用途：用于外泌体/细胞外囊泡的"清洁收集"，获得更高产量和更简便的下游处理

8. 支持细胞类型：hMSC（骨髓/脂肪/脐带）、iPSC-MSC、永生化 MSC、真皮成纤维细胞及其他贴壁与悬浮细胞

9. 培养规模：2D 批次培养 + 3D 生物反应器Fed-Batch培养

10. 收集时间：6–72 小时扩展收集窗口

11. 等级：研究级（RUO），另有 cGMP 级版本 RoosterCollect-EV-CC可供临床级应用

12. 法规支持：cGMP 级版本有美国 FDA II 型药物主文件（Master File）支持，可用于申报过程交叉引用

13. 产地：RoosterBio, Inc.，美国马里兰州

图1. RoosterCollect-EV外泌体收集培养基

二、化学成分限定配方的核心优势

1. 什么是"化学成分限定"培养基？

化学成分限定（Chemically Defined, CD）培养基是指培养基中的所有成分均为已知化学结构，不含任何动物源或植物源提取物（如血清、水解物、生长因子混合物）。每一批次的成分、浓度和来源均可追溯，从根本上消除了批次间差异。

2. 818号令背景下化学成分限定培养基的战略价值

2026年5月1日818号令全面施行，外泌体收集阶段培养基合规性成为临床研究备案的核心考核项，在此背景下，RoosterCollect-EV的化学成分限定配方展现出三大核心战略价值：

• 全成分可追溯：所有成分化学结构已知，无动物源添加物，满足备案审查对物料合规性的基本要求

• 批次间一致性：合成配方消除了FBS等天然提取物的批间差异，确保生产数据在时间和空间上的可比性

• cGMP合规升级路径：研究级培养基建立的工艺参数，可直接平移至RoosterCollect-EV-CC（cGMP级），无需在临床转化阶段更换核心试剂或重新验证工艺

3. 现阶段收集培养基的问题

传统DMEM+10%胎牛血清（FBS）体系虽可维持间充质干细胞正常增殖，但应用于外泌体收集环节存在多重致命缺陷：血清自带大量牛源天然囊泡与高浓度杂蛋白，不仅抬高样本颗粒背景、干扰产物定性定量检测，还会大幅增加下游纯化除杂压力，拉长生产链路、降低外泌体收率。行业常规替代方案为普通无血清培养基，该体系虽规避了血清源性杂质风险，却因配方多采用复合水解提取物、营养组分不均衡，长期上清收集过程中难以稳定维系细胞活性，容易造成细胞活力衰减、外泌体分泌量明显下滑，难以兼顾产物纯度与生产产能。

图2.RoosterCollect-EV培养基与含血清/无血清培养基对比

三、低背景颗粒

RoosterCollect-EV的核心竞争力不仅体现在全化学成分限定（CD）的合规配方体系，更在于其经过专项质控验证的超低颗粒本底设计。

1. 保障终产物高纯度

该培养基从配方源头规避外源颗粒杂质引入，在hMSC扩增换液至EV收集的全流程中，不会带入异源囊泡、蛋白聚集体等干扰颗粒，可直接收获高纯度细胞外囊泡上清，大幅降低产物中杂颗粒占比，无需繁复的多级预处理即可获得符合质控标准的EV样品。

2. 简化下游纯化工艺

依托低本底颗粒特性，收集上清中的非目标杂质负荷明显下降，有效缓解TFF切向流浓缩、SEC尺寸排阻层析等下游纯化单元的除杂压力，缩短整体生产链路。

3. 配套质控保障

产品出厂设置颗粒物专项放行标准，严格控制单批次培养基总颗粒数≤1×10⁸ particles/mL，严格控制培养基背景颗粒对下游影响。

四、RoosterCollect-EV活性与产量表现

RoosterCollect-EV已在包括hMSC、iPSC-MSC、永生化MSC、真皮成纤维细胞在内的多种细胞系中完成验证，在2D和3D培养条件下均表现出稳定的外泌体收集效率。

1. 3D生物反应器规模化表现

RoosterBio在与PBS垂直轮生物反应器系统联用的规模化培养中，RoosterCollect-EV可支持MSC-EV的高产率连续收集。收集时间窗口6–72小时的设定为工艺开发提供了充分的灵活性，研究者可根据目标产物特性（如粒径分布、表面标志物）灵活调整收集时机。

图3.使用RoosterCollect-EV培养基在3D培养的结果

2. 下游处理兼容性

低颗粒、无蛋白的配方使得RoosterCollect-EV收集的外泌体产物可直接进入下游纯化流程（如TFF浓缩、SEC纯化、超速离心），无需额外的去蛋白或去脂蛋白预处理步骤，提高了全流程效率。

五、RoosterCollect-EV的特色应用

1. MSC来源外泌体（MSC-EV）生产：与RoosterBio的hMSC细胞库（骨髓/脂肪/脐带）及RoosterNourish扩增培养基联合使用，构成从细胞扩增到外泌体收集的完整生产线。

2. iPSC-MSC及工程化MSC外泌体收集：已验证支持iPSC-MSC和永生化MSC的外泌体生产，适用于基因工程改造后的细胞株。

3. 3D生物反应器规模化培养：提供封闭系统袋装格式，适配生物反应器培养，支持从工艺开发到中试生产的线性放大。

4. 外泌体药物开发与质控：化学成分限定配方确保每批次产物的一致性，配合cGMP级版本，适合作为外泌体药物开发的标准化生产培养基。

5. 申报备案级外泌体生产：RUO+cGMP双轨产品线，从研究到临床申报无需更换核心培养基，降低合规风险。

六、完整的RoosterBio外泌体产品生态

RoosterCollect-EV并非孤立产品，而是RoosterBio外泌体解决方案生态中的核心一环。围绕外泌体全流程（上游培养→收集→下游纯化），RoosterBio提供以下配套产品。

图4.RoosterBio系列产品和功能定位

从RoosterNourish细胞扩增，切换到RoosterCollect-EV进行外泌体收集，再到AgentV-DSP进行下游纯化的整套产品线，打通MSC外泌体从"培养"到"收集"再到"纯化"的整条链路。

七、关于RoosterBio品牌

RoosterBio成立于2013年，总部位于美国马里兰州，是全球MSC生物制造领域的有名企业。公司专注于提供高度工程化的hMSC细胞库、生物工艺培养基及外泌体生产解决方案，致力于从根本上简化间充质干细胞和外泌体的规模化生产工艺。

· 核心产品线：cGMP细胞库（骨髓/脂肪/脐带hMSC）、RoosterNourish免换液扩增培养基、RoosterReplenish生物反应器补料、RoosterCollect-EV外泌体收集培养基

· 产品等级：研究级（RUO）/CliniControlcGMP级双轨并行

· 法规支持：FDAII型药物主文件（MasterFile）、国际监管支持档案，支持申报时交叉引用

· 全球覆盖：产品被全球多个GMP生产项目采用，自2019年起支持临床试验级生产

上海曼博生物（MineBio）是RoosterBio在中国正式合作伙伴，可为国内研究者提供RoosterBio全线产品的进口、技术支持和本地化服务，欢迎扫描下方图片访问曼博生物了解更多关于RoosterBio培养基产品信息或获取技术文档。

本文基于RoosterBio公开资料由其中国提供商上海曼博生物整理，用于科研信息分享、实验参考等。上海曼博生物可提供RoosterCollect-EV外泌体收集培养基、RoosterCollect-EV-CCcGMP级培养基、AgentV-DSP等全系列产品，支持MSC外泌体生产、3D生物反应器培养、下游纯化及工艺开发等科研与工业应用。上海曼博生物还可提供外泌体解决方案，欢迎扫描下方图片访问曼博查看！